白刺花胚性愈伤组织诱导和植株再生体系建立

吴丽芳, 魏晓梅, 陆伟东*
曲靖师范学院生物资源与食品工程学院, 云南高原生物资源保护与利用研究中心, 云南曲靖655011

通信作者:陆伟东;E-mail: 520137982@qq.com

摘 要:

本文探讨了不同因素对白刺花(Sophora davidii)下胚轴、子叶、茎段三种外植体胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。以MS为基本培养基, 研究了2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)对胚性愈伤组织诱导的影响, 蔗糖对胚性细胞状态的调整, 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和噻苯隆(TDZ)对体细胞胚形成的调控, 以及脱落酸(ABA)对体细胞胚萌发的影响。白刺花不同外植体接种于愈伤组织诱导培养基上, 能形成胚性、部分胚性和非胚性三种不同类型的愈伤组织, 下胚轴和茎段最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+40 g·L-1蔗糖+3 g·L-1植物凝胶+100 mg·L-1谷氨酰胺+10 g·L-1香蕉泥, 诱导率分别为73.8%和41.5%; 子叶最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+40 g·L-1蔗糖+3 g·L-1植物凝胶+100 mg·L-1谷氨酰胺+10 g·L-1香蕉泥, 诱导率为57.1%。 2.0 mg·L-1 6-BA时, 下胚轴体胚发生率最高, 为66.67%, 总胚数为74个·g-1; 子叶体胚发生率为57.65%, 总胚数为61个·g-1; 茎段体胚发生率49.12%, 总胚数为44个·g-1。 1.0 mg·L-1 TDZ时以下胚轴和茎段为外植体的体胚发生率最高分别为80.81%和69.18%, 获得总胚数分别为113和69个·g-1; TDZ浓度为1.5 mg·L-1时, 子叶体胚发生率最高, 为71.77%, 总胚数87个·g-1。 0.5~1.0 mg·L-1 ABA时, 体细胞胚萌发率相对较高, 幼苗生长比较健壮。

关键词:白刺花; 下胚轴; 子叶; 茎段; 胚性愈伤组织; 体细胞胚发生

收稿:2018-10-08   修定:2019-01-26

资助:云南省教育厅项目(2014Y440)和曲靖师范学院教育教学改革项目(JGXM2016013和JGXM201812)。

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